En química, la dilució és el procés de reducció de la concentració d’una substància en una solució. La dilució en cadena és la dilució repetida d’una solució per augmentar ràpidament el factor de dilució. Aquest procediment es realitza normalment en experiments que requereixen solucions molt diluïdes amb alta precisió. Per exemple, experiments relacionats amb corbes de concentració a escala logarítmica o experiments per determinar la densitat de bacteris. Les dilucions en cadena s’utilitzen àmpliament en experiments científics com bioquímica, microbiologia, farmacologia i física.
Pas
Mètode 1 de 2: realitzar una dilució bàsica
Pas 1. Determineu la solució adequada de diluant
És molt important determinar el líquid que s’ha d’utilitzar per diluir. Moltes solucions són solubles en aigua destil·lada, però no sempre és així. Si diluïu bacteris o altres cèl·lules, feu-ho en un medi de cultiu. El líquid que trieu s’utilitzarà per a totes les dilucions de la cadena.
Si teniu dubtes sobre quin diluent utilitzar, busqueu ajuda o busqueu en línia. Cerqueu exemples d'altres que han fet dilucions de cadena similars
Pas 2. Prepareu una sèrie de provetes que continguin 9 ml de diluant
Les provetes s’utilitzen per a dilucions buides. Primer, poseu la mostra no diluïda al primer tub i, a continuació, feu les dilucions successivament als següents.
- Marqueu tots els tubs utilitzats abans de començar la dilució perquè no us confongueu un cop s'hagi executat l'experiment.
- Cada tub s’omplirà de 10 dilucions, començant pel tub la substància de la qual no s’ha diluït. La dilució al primer tub és 1:10, seguida de 1: 100 al segon tub, 1: 1000 per al tercer, etc. Determineu la quantitat de dilució que s’ha de dur a terme amb antelació per tal de no malgastar la solució diluent.
Pas 3. Prepareu un tub d'assaig que contingui almenys 2 ml de solució sense diluir
La quantitat mínima de solució a diluir necessària per dur a terme aquesta dilució en cadena és d'1 ml. Si només utilitzeu 1 ml, no quedarà cap solució sense diluir. Etiqueta BLM per a solucions sense diluir.
Barregeu bé la solució abans de començar qualsevol dilució
Pas 4. Realitzeu la primera dilució
Preneu 1 ml de la solució no diluïda del tub d’assaig BLM amb una pipeta i poseu-la en una proveta etiquetada amb 1:10 que contingui 9 ml de diluant i, a continuació, barregeu-la bé. Ara hi ha 1 mL de la solució no diluïda en 9 mL del diluent. Per tant, la solució s’ha diluït amb un factor de dilució de 10.
Pas 5. Realitzeu la segona dilució
Per a la segona dilució, pren 1 mL de la solució del tub 1:10 i, a continuació, introdueix-la al tub 1: 100 que també conté 9 mL del diluent. Assegureu-vos que la solució del tub 1:10 estigui completament barrejada abans d’afegir-la al següent tub. Una vegada més, assegureu-vos que la dilució del tub 1: 100 està completament barrejada. La solució del tub 1:10 es va diluir 10 vegades al tub 1: 100.
Pas 6. Continueu aquest procediment per realitzar dilucions de cadena més llargues
Aquest procés es pot repetir tantes vegades com sigui necessari per obtenir la concentració de solució desitjada. En experiments amb corbes de concentració, podeu realitzar dilucions de cadena per produir diverses solucions amb dilucions d’1, 1:10, 1: 100, 1: 1.000.
Mètode 2 de 2: càlcul del factor de dilució i de la concentració final
Pas 1. Calculeu la proporció de l'última dilució de la dilució en cadena
La relació de dilució total es pot determinar multiplicant el factor de dilució de cada pas al pas final. La il·lustració matemàtica és amb la fórmula Dt = D1 x D2 x D3 x … x D , Dt és el factor de dilució total i D és la proporció de diluant.
- Per exemple, suposem que feu una dilució 1:10 4 vegades. Connecteu el factor diluent a la fórmula: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
- El factor diluent del quart tub d’aquesta dilució en cadena és d’1: 10.000. La concentració de la substància després de la dilució és 10.000 vegades menor que abans de diluir-la.
Pas 2. Determineu la concentració de la solució després de la dilució
Per determinar la concentració final d’una solució després d’una dilució en cadena, n’heu de conèixer la concentració inicial. La fórmula és Cfinal = Cinici/ D, C.final és la concentració final de la solució diluïda, Cinici és la concentració inicial de la solució original i D és la relació de dilució predeterminada.
- Per exemple: si comenceu amb una solució cel·lular la concentració de la qual és de 1.000.000 de cèl·lules per ml i la proporció de dilució és de 1.000, quina és la concentració final de la mostra diluïda?
-
Mitjançant la fórmula:
- Cfinal = Cinici/ D
- Cfinal = 1.000.000/1.000
- Cfinal = 1000 cèl·lules per ml.
Pas 3. Assegureu-vos que totes les unitats siguin iguals
En realitzar qualsevol càlcul, assegureu-vos que les unitats siguin sempre les mateixes al final del càlcul. Si la unitat inicial és de cel·les per ml, assegureu-vos que les unitats continuïn sent les mateixes al final del càlcul. Si la concentració inicial és de parts per milió (bpd), la concentració final també ha de ser en unitats de bpj.
