Les pipetes són equips de laboratori que s’utilitzen per mesurar i transferir volums molt petits de líquids. La precisió en les mesures de la pipeta és molt important perquè les diferències en el volum caigut per la pipeta poden afectar els resultats experimentals. Per garantir la precisió, és important comprovar el calibratge de la pipeta cada pocs mesos. El procés de calibratge és útil per comprovar si aquest equip goteja líquid al volum adequat, de manera que es poden fer reparacions si cal.
Pas
Part 1 de 2: Comprovació de la calibració
Pas 1. Reuneix els materials necessaris
Per comprovar el calibratge de la pipeta, el que cal és una pipeta, puntes de pipeta, aigua destil·lada, vas de precipitats, termòmetre, balança i tassa de pesatge. El balanç utilitzat ha d’estar en escala de micrograms per calibrar la micropipeta amb un valor màxim d’1 L.
- No necessiteu més de 5 ml d'aigua. Ompliu el vas de precipitats amb aigua.
- Assegureu-vos que la punta de la pipeta sigui correcta i s’adapti perfectament a la pipeta.
Pas 2. Mesureu la temperatura de l'aigua destil·lada
Poseu el termòmetre a l’aigua i deixeu-lo reposar almenys un minut. Si la línia vermella del termòmetre encara es mou, espereu un minut més. Al cap d’un minut, anoteu la temperatura. Agafa el termòmetre i asseca’l quan hagis acabat.
És important conèixer la temperatura de l’aigua, ja que s’utilitzarà per als càlculs realitzats per comprovar el calibratge
Pas 3. Col·loqueu la tassa de pesatge sobre la balança i poseu a zero la balança
L’ideal seria que la balança utilitzada tingués una porta i un espai aïllat a l’interior. Col·loqueu el pesador a la cambra d’equilibri i tanqueu la porta. Si la balança no té cap cubicle ni porta, poseu-hi una tassa de pesatge sobre la balança. Premeu el botó "Zero" o "Tara" i espereu que l'escala mostri zero.
Posar a zero la bàscula redueix el pes del got de plàstic i permet pesar només el pes de la substància col·locada al got
Pas 4. Prepareu la pipeta per al calibratge
Netegeu la pipeta amb etanol abans de començar i assegureu-vos que res no obstrueixi la punta de la pipeta. Connecteu la punta de la pipeta correcta a la punta de la pipeta i determineu el volum a provar.
Per al calibratge, proveu els volums més petits i petits que es poden treure de la pipeta
Pas 5. Renteu la punta de la pipeta abans de calibrar-la
Premeu el botó fins al primer límit i submergeix la punta de la pipeta a l'aigua destil·lada fins a una profunditat d'aproximadament 2 mm. Deixeu anar el botó per absorbir una mica del líquid i, a continuació, deixeu-lo anar prement el botó. Repetiu aquest pas tres vegades per rentar els consells del comptagotes abans d’utilitzar-lo.
Premeu el botó fins al segon límit per eliminar el líquid restant de la punta de la pipeta i, a continuació, traieu la pipeta de l’aigua
Pas 6. Aspirar el volum de calibratge
Amb la punta de la pipeta situada fora de l'aigua destil·lada, premeu el botó fins al primer límit. Immergiu la punta de la pipeta 2 mm de profunditat a l’aigua destil·lada i deixeu anar el botó per aspirar el líquid a la punta de la pipeta. Espereu aproximadament 1 segon abans de treure la punta del comptagotes de l’aigua.
Assegureu-vos que la punta de la pipeta estigui totalment submergida durant el procés d’aspiració. No hi ha d’haver bombolles a la punta del comptagotes o el resultat pot ser erroni
Pas 7. Aboqueu el líquid al plat de pesatge de la balança
Col·loqueu la punta de la pipeta a la part inferior de la tassa de pesatge i, a continuació, premeu el botó de la pipeta fins al primer límit. Desplaceu-vos a un altre punt, una mica allunyat de l'aigua, i premeu el botó fins al segon límit. Mantenint premut el botó, aixequeu la punta de la pipeta de la pesadora.
Mantingueu la punta unida a la pipeta, ja que la tornareu a utilitzar per fer altres proves de calibratge
Pas 8. Anoteu el pes que es mostra a la balança
Tanqueu la porta de la cabina d’equilibri si utilitzeu una balança. Espereu fins que els números ja no canviïn. Escriu a la teva llibreta.
És important esperar fins que els números de l’escala no tornin a canviar abans d’escriure’ls. Les notes funcionaran malament si no espereu
Pas 9. Repetiu aquest procés per realitzar la lectura almenys 10 vegades
Torneu a posar a zero la bàscula, renteu les puntes de la pipeta abans d’utilitzar-la, aspireu el mateix volum de líquid, traieu-ne el volum i, a continuació, anoteu el pes. Anoteu el pes de l'aigua destil·lada per al mateix volum i, a continuació, feu una mitjana de totes les notes.
Podeu repetir aquest procés per a volums diferents si cada volum es prova diverses vegades
Part 2 de 2: càlcul del resultat de la calibració
Pas 1. Definiu la fórmula del volum calculat
La fórmula per calcular el volum de líquid expulsat per la pipeta és V = w * Z, w és el pes de l’aigua, Z és el factor de conversió basat en la densitat de l’aigua, mentre que V és el volum de la quantitat d’aigua eliminat.
- La variable Z es pot obtenir calculant la densitat de l’aigua mitjançant la temperatura registrada al començament de l’experiment.
- Per exemple: si la temperatura de l'aigua és de 23 ° C, el valor Z és de 1,0035 g / mg.
Pas 2. Calculeu la mitjana global de les calibracions de les pipetes
El volum d’aigua alliberat per la pipeta s’ha pesat almenys deu vegades. Per fer la mitjana de tots aquests valors, afegiu-los tots junts i dividiu-los per 10. Si heu fet més o menys del procés, sumeu els resultats generals i, a continuació, dividiu-los pel nombre d’assaigs realitzats.
- Per exemple: el pes de l'aigua dels 10 experiments que heu realitzat amb la pipeta de 10 µL és el següent: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 i 9, 98.
- La mitjana és: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98) / 10 = 99, 84/10 = 9.984
Pas 3. Connecteu les variables a l'equació i resoleu
Un cop hàgiu determinat el nombre correcte per a cada variable, connecteu-lo a la fórmula i completeu el volum calculat. Per resoldre aquesta equació, simplement multipliqueu el pes mitjà de totes les proves pel valor Z.
Per exemple: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Pas 4. Calculeu la precisió de la pipeta
Utilitzeu l’equació A = 100 x Vmitjana/ V0 per calcular la precisió de la pipeta. A indica la precisió de la pipeta, Vmitjana és el volum mitjà calculat i V0 és el valor establert a la pipeta. El valor de precisió ha d’estar entre el 99-101%.
- Si la pipeta està correctament calibrada, el valor calculat hauria de ser molt proper al valor real establert a la pipeta.
- Per exemple: A = 100 x Vmitjana/ V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1.0019 = 100,19%
- Aquesta pipeta està correctament calibrada.
Pas 5. Si cal, envieu la pipeta per calibrar-la
Si la pipeta no supera la prova de calibratge, no l’utilitzeu ara mateix per experimentar. Les pipetes són equips de laboratori molt fràgils i costosos. No podeu solucionar el calibratge vosaltres mateixos, la pipeta s’ha d’enviar per reparar-la. Com a alternativa, diverses empreses vindran al vostre laboratori i calibraran la pipeta in situ.
